5种致泻大肠埃希氏菌实时荧光定量PCR快速检测技术_王芳妹

发表时间:2020-07-30来源:北京卓诚惠生浏览次数:979 分享:

摘要:将5种致泻大肠埃希氏菌的毒力基因保守序列进 行设计并合成了引物和探针,建立的多重实时荧光PCR4种试剂盒可以同时检测5种致泻大肠埃希氏菌。结果表明:4种试剂盒的12对毒力基因通过5种 致 泻 大 肠 埃 希氏菌的标准储备菌株均得到验证;并且12对毒力基因只对对应的致泻大肠埃希氏菌特异性起作用,对常见的食 源性致病菌都无扩增曲线;escV、bfpB、stx1、ipaH和invE基因的检出限是10CFU/mL,aggR 基因的检出限是102CFU/mL,astA和pic基因的检出限是103CFU/mL,而stx2A、ipaH和stIb基因菌液浓度<10CFU/mL时, 均可观察到明显的“S”型扩增曲线,且线形较好;并且对抽查和委托检验的肉 类、奶和动物腹泻物以及人工污染 样品等 40份样品进行检测,共检出11份阳性样本,与GB4789.6—2016标准检测结果相一致,表明建立的4种 试剂盒方法具有良好的实用性。 

关键词:致泻大肠埃希氏菌;实时荧光定量PCR;毒力基因

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